步:解凍細(xì)胞
細(xì)胞保存在-196℃的液氮罐中,需取出后在37℃水浴鍋中搖晃解凍融化。
第二步:細(xì)胞離心操作
將解凍好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到生物安全柜內(nèi),用移液器吸出,轉(zhuǎn)移至離心管中在離心機(jī)中離心。
第三步:接種
將離心好的的細(xì)胞在生物安全柜內(nèi)用移液器棄掉上清液,加入合適的培養(yǎng)基,接種在培養(yǎng)皿內(nèi)放在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
生物安全柜工作原理:
將柜內(nèi)空氣向外抽吸,使柜內(nèi)保持負(fù)壓狀態(tài),通過垂直氣流來保護(hù)工作人員;外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器( high-efficiency particulate air filter, HEPA過濾器)過濾后進(jìn)入安全柜內(nèi),以避免處理樣品被污染;柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過HEPA過濾器過濾后再排放到大氣中,以保護(hù)環(huán)境。